在醫(yī)院的檢驗(yàn)科里,每天都有無(wú)數(shù)份血液標(biāo)本等待檢測(cè)。當(dāng)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀發(fā)出“異常警報(bào)” 時(shí),醫(yī)生總會(huì)拿出一張薄薄的玻璃片 —— 血涂片。它被稱為血液細(xì)胞的“顯微寫真集”。通過(guò)顯微鏡下的細(xì)致觀察,這張不足 1 平方厘米的涂片,能為白血病、貧血、感染等多種疾病的診斷提供關(guān)鍵線索。接下來(lái),讓我們走進(jìn)血涂片的微觀世界,了解這項(xiàng)傳承百年的經(jīng)典檢驗(yàn)技術(shù)。
一、血涂片:血液的「立體掃描儀」
血涂片是將少量血液均勻涂抹在玻璃片上,經(jīng)過(guò)染色后在顯微鏡下觀察血細(xì)胞形態(tài)的檢查方法。它就像一臺(tái)“細(xì)胞級(jí) CT”,能捕捉全自動(dòng)儀器無(wú)法識(shí)別的細(xì)微變化:紅細(xì)胞是否出現(xiàn)鐮刀狀、靶形等異常形態(tài),白細(xì)胞是否存在幼稚細(xì)胞或毒性顆粒,血小板是否聚集或形態(tài)異常。這些微觀細(xì)節(jié),正是血液系統(tǒng)疾病的早期 “信號(hào)燈”。
(一)制作過(guò)程:匠心打造的細(xì)胞標(biāo)本
涂片制備:用微量吸管吸取2-3 微升血液(約半粒小米大小),滴在載玻片一端,以 45° 角推片形成厚薄均勻的薄膜。理想的涂片應(yīng)呈現(xiàn) “舌狀”,頭部為血小板聚集區(qū),體部分布紅細(xì)胞,尾部便于觀察白細(xì)胞。推片速度和角度的細(xì)微差異,都會(huì)影響細(xì)胞的分布狀態(tài)。
染色工藝:最常用的瑞氏染色法(Wright stain),利用酸性染料(伊紅)和堿性染料(亞甲藍(lán))的差分著色原理,使細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞質(zhì)呈淡紅色,顆粒成分呈現(xiàn)獨(dú)特色澤(如嗜酸性粒細(xì)胞的橘紅色顆粒)。染色時(shí)間、染液 pH 值的精確控制,是呈現(xiàn)清晰細(xì)胞結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵。
(二)觀察內(nèi)容:三類細(xì)胞的「形態(tài)密碼」
紅細(xì)胞(RBC):正常紅細(xì)胞呈雙凹圓盤狀,直徑 7-8 微米。若出現(xiàn):
小細(xì)胞(直徑<6μm):常見(jiàn)于缺鐵性貧血、 thalassemia(地中海貧血);
大細(xì)胞(直徑>10μm):提示巨幼細(xì)胞性貧血(葉酸 / B12 缺乏);
異形紅細(xì)胞(靶形、淚滴形、破碎紅細(xì)胞):可見(jiàn)于肝病、骨髓纖維化、彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)。
白細(xì)胞(WBC):通過(guò)分類計(jì)數(shù)(占比 50%-70% 的中性粒細(xì)胞、20%-40% 的淋巴細(xì)胞等)和形態(tài)觀察:
中性粒細(xì)胞出現(xiàn)中毒顆粒、空泡變性:提示細(xì)菌感染、嚴(yán)重創(chuàng)傷;
淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異型性(如Downey 細(xì)胞):常見(jiàn)于 EB 病毒感染(如傳染性單核細(xì)胞增多癥);
發(fā)現(xiàn)原始/ 幼稚細(xì)胞:必須警惕白血病,需進(jìn)一步做流式細(xì)胞或基因檢測(cè)。
血小板(PLT):正常血小板呈小圓盤狀,散在分布。血小板聚集可能導(dǎo)致儀器計(jì)數(shù)偏低,而巨大血小板(如遺傳性血小板?。┗蛐螒B(tài)異常,可能提示凝血功能異常。
二、臨床應(yīng)用:從常見(jiàn)病到疑難病的「?jìng)刹毂?/strong>
(一)血液系統(tǒng)疾病的「金標(biāo)準(zhǔn)」
貧血診斷:僅憑血細(xì)胞分析儀的血紅蛋白數(shù)值,無(wú)法區(qū)分缺鐵性貧血與地中海貧血。血涂片上,缺鐵性貧血表現(xiàn)為紅細(xì)胞體積小、中央淡染區(qū)擴(kuò)大;地中海貧血?jiǎng)t可見(jiàn)靶形紅細(xì)胞和嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞。
白血病篩查:當(dāng)分析儀提示“幼稚細(xì)胞增多” 時(shí),血涂片鏡檢能直接觀察到原始細(xì)胞的比例和形態(tài)(如急性早幼粒細(xì)胞白血病的 Auer 小體),為分型診斷提供依據(jù)。2023 年《中華血液學(xué)雜志》數(shù)據(jù)顯示,血涂片對(duì)白血病的初篩陽(yáng)性率達(dá) 92.3%,是骨髓穿刺前的關(guān)鍵預(yù)判手段。
(二)感染性疾病的「快速檢測(cè)儀」
細(xì)菌vs 病毒感染:細(xì)菌感染時(shí),中性粒細(xì)胞常出現(xiàn)核左移(桿狀核增多)和毒性顆粒;病毒感染則以淋巴細(xì)胞增多為主,可見(jiàn)異型淋巴細(xì)胞(如新冠病毒感染時(shí)的活化 T 細(xì)胞)。
寄生蟲(chóng)篩查:在瘧疾流行區(qū),血涂片吉姆薩染色(Giemsa stain)可直接檢出紅細(xì)胞內(nèi)的瘧原蟲(chóng)環(huán)狀體、裂殖體,是世界衛(wèi)生組織推薦的瘧疾確診方法,尤其適用于基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)。
(三)其他系統(tǒng)疾病的「輔助鏡鑒」
多發(fā)性骨髓瘤:血涂片中可見(jiàn)“緡錢狀紅細(xì)胞”(紅細(xì)胞呈串狀排列),提示高球蛋白血癥;
血栓性疾病:血小板聚集、破碎紅細(xì)胞(裂體細(xì)胞)增多,可能預(yù)示血栓性血小板減少性紫癜(TTP);
肝病診斷:靶形紅細(xì)胞、棘形紅細(xì)胞的出現(xiàn),與肝硬化、膽汁淤積性肝病密切相關(guān)。
三、從「人工鏡檢」到「智能輔助」:技術(shù)革新中的堅(jiān)守
盡管全自動(dòng)血液分析儀已實(shí)現(xiàn)99% 的標(biāo)本自動(dòng)化檢測(cè),但血涂片鏡檢仍是不可替代的 “質(zhì)量控制關(guān)卡”。2022 年《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》明確規(guī)定:當(dāng)出現(xiàn)白細(xì)胞 / 血小板計(jì)數(shù)異常、貧血、原始細(xì)胞報(bào)警等 12 種情形時(shí),必須進(jìn)行人工鏡檢。
(一)標(biāo)準(zhǔn)化操作的重要性
標(biāo)本合格性:采血不順暢導(dǎo)致的凝血、EDTA 抗凝劑引起的血小板聚集,都會(huì)造成鏡檢誤判,需重新采血;
形態(tài)學(xué)陷阱:某些藥物(如化療藥)會(huì)導(dǎo)致白細(xì)胞核固縮,需結(jié)合臨床病史綜合判斷;
質(zhì)量控制:檢驗(yàn)科需定期進(jìn)行形態(tài)學(xué)考核,確保不同檢驗(yàn)醫(yī)師對(duì)“異型淋巴細(xì)胞”“原始細(xì)胞” 的判斷標(biāo)準(zhǔn)一致。
(二)AI 技術(shù)的助力與局限
近年來(lái),基于深度學(xué)習(xí)的AI 閱片系統(tǒng)(如 CellaVision DM96)已能自動(dòng)識(shí)別 90% 以上的常見(jiàn)細(xì)胞形態(tài),將鏡檢時(shí)間從平均 15 分鐘縮短至 5 分鐘。但面對(duì)罕見(jiàn)?。ㄈ缑?xì)胞白血病的 “毛發(fā)狀” 細(xì)胞突起),仍需檢驗(yàn)醫(yī)師的經(jīng)驗(yàn)判斷。正如《檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)》2024 年研究指出:AI 是 “高效的助手”,而人類是 “最終的決策者”。
四、給受檢者的「貼心提示」
標(biāo)本要求:避免劇烈運(yùn)動(dòng)后采血(可能導(dǎo)致白細(xì)胞暫時(shí)升高),盡量采用EDTA 抗凝靜脈血(指尖血易受組織液污染);
報(bào)告解讀:當(dāng)報(bào)告提示“可見(jiàn)異型淋巴細(xì)胞”“建議鏡檢復(fù)核” 時(shí),不必恐慌,及時(shí)咨詢醫(yī)生結(jié)合癥狀分析;
兒童特殊注意:嬰幼兒的淋巴細(xì)胞比例天然高于成人(4-6 歲后逐漸接近成人水平),需參考兒童特異性參考范圍。
結(jié)語(yǔ):顯微世界的健康守護(hù)者
從19 世紀(jì)末 Romanowsky 染色法的誕生,到 21 世紀(jì) AI 與形態(tài)學(xué)的結(jié)合,血涂片始終是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的 “活化石”。它用最直觀的方式,將血液中的細(xì)胞故事娓娓道來(lái) —— 那些顯微鏡下的紅藍(lán)交織,不僅是細(xì)胞的形態(tài)圖譜,更是連接生命微觀與宏觀的橋梁。下次當(dāng)您的血常規(guī)報(bào)告出現(xiàn) “異常” 提示時(shí),請(qǐng)記?。耗切⌒〉难科休d著解開(kāi)健康謎題的關(guān)鍵密碼。